Porcine Acute Diarree Syndrome Coronavirus (SADS-CoV) is in nij ûntdutsen porcine enteric pathogenic coronavirus dat wetterige diarree kin feroarsaakje by pasgeborene biggen en signifikante ekonomyske ferliezen feroarsaakje foar de pig-yndustry.Op it stuit is d'r gjin geskikte serologyske metoade om de effektiviteit fan SADS-CoV-ynfeksje en faksin te evaluearjen, dus d'r is in driuwende needsaak om in effektive enzyme-keppele immunosorbent-assay (ELISA) te brûken om dit tekoart goed te meitsjen.Hjir waard in rekombinant plasmide dat SADS-CoV spike (S) proteïne útdrukt fusearre mei minsklik IgG Fc-domein waard konstruearre om rekombinant baculovirus te produsearjen en útdrukt yn HEK 293F-sellen.It S-Fc-proteïne wurdt suvere mei proteïne G-hars en behâldt de reaktiviteit mei anty-minsklike Fc- en anty-SADS-CoV-antylders.Dêrnei waard S-Fc-protein brûkt om yndirekte ELISA (S-iELISA) te ûntwikkeljen en de reaksjebetingsten fan S-iELISA te optimalisearjen.As gefolch, troch analysearjen fan de OD450nm wearde fan 40 SADS-CoV negative sera befêstige troch immunofluorescence assay (IFA) en Western blotting, waard de cut-off wearde bepaald op 0.3711.De koëffisjint fan fariaasje (CV) fan 'e 6 SADS-CoV positive sera binnen en tusken runen fan S-iELISA wiene allegear minder dan 10%.De cross-reactivity test liet sjen dat S-iELISA gjin cross-reactivity hat mei oare porcine firus sera.Dêrnjonken wie, basearre op 'e deteksje fan 111 klinyske serummonsters, it algemiene tafal fan IFA en S-iELISA 97,3%.De firusneutralisaasjetest mei 7 ferskillende OD450nm-wearden fan serum liet sjen dat de OD450nm-wearde ûntdutsen troch S-iELISA posityf korrelearre wie mei de firusneutralisaasjetest.Uteinlik waard S-iELISA útfierd op 300 pig farm serum samples.Kommersjele kits fan oare porcine enteroviruses lieten sjen dat de IgG-positive tariven fan SADS-CoV, TGEV, PDCoV en PEDV respektivelik 81.7%, 54% en 65.3% wiene.6% respektivelik.De resultaten litte sjen dat de S-iELISA spesifyk, gefoelich en reprodusearber is en kin wurde brûkt om SADS-CoV-ynfeksje te detektearjen yn 'e pig-yndustry.Dit artikel is beskerme troch auteursrjocht.alle rjochten foarbehâlden.
Posttiid: Jun-22-2021